Aهي تقنية مخبرية تم اكتشافها عام 1983 تقوم على اكثار نسخ DNA خارج النظام الحيوي او هي طريقة نسخ DNA في المختبر
متطلباتPCR 1-
جهاز التحكم بدرجات الحرارة للتفاعل بشكل دقيق ومتتالي(Thermocycle ) يقوم هذا الجهاز بتغير درجة الحرارة بشكل سريع
2-البليمريز:-وهو الانزيم الذي يقوم ببناء وترتيب القواعد النتروجينية ويجب ان يكون هذا الانزيم مقاوم للحرارة العاليةليتمكن من العمل
3-مجموعة متفرقة من القواعد النتروجينية (ATCG ) ليتمكن الانزيم من ترتيبها في موقعها اثناء عملية النسخ
4-بريمر(primer) :- وهو قطعة صغيرة من DNA ليتمكن الانزيم من بدء البناء والنسخ عليه
5-الشي الاهم هو وجود نسخة من الحمض النووي المراد نسخها
5-بلاضافة الى وسط او محلول ليتم به التفاعل وهذا المحلول يختلف من تفاعل لاخر
طريقة العمل:-i-
يوضع الالحمض النووي المراد نسخة مع انزيم البليمريزوالبريمر في انبوب داخل جهاز التحكم الحراري ليم بثلاث مراحل:-
1-مرحلة التفكيك(Denatre ):, وهي مرحلة رفع درجة الحرارة الى 94 وذلك لفك الحمض النووي الاصل وتستغرق هذه المرحلة دقيقة واحدة
2-مرحلة الالتصاق (anneal) وهي انزال درجة الحرارة الى مابين 55_60 ليقوم البريمر بلالتصاق فزيائيابواسطة الروابط الهيدروجينية مع الحمض النووي الاصل وتستغرق 45 ثانية
3-مرحلة الامتداد(extend ):- مرحلة رفع درجة الحرارةالى 75 ليقوم البليمريز بعملة في بناء الحمض النووي الجديد وزمنها دقيقتان
تطبيقات PCR:-
1-الكشف عن الطفرات الوراثية
2-تعيين البصمة الوراثية
3-الكشف عن الفيروسات
4-معرفة طول الحمض النووي
5-تقنية الحمض النووي
انواع PCR
:-
1-normalpcr :-وهو الذي قمنا بشرحة
2-real time pcr:-ويكون مرتبط بجهاز كمبيوتر لتحديد الوقت الحقيقي لبدا التفاعلومن ثم الكمية الحقيقية لعدد نسخ DNA

الموضوع الأصلي: تقنية pcr || الكاتب: كبريـ انثى ـاء ||